百迪小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14 1×106cells/T25培养瓶
- 品名： 百迪小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14 1×106cells/T25培养瓶
- 品牌： 百迪生物
- 型号： C5102
- 产品详情
- 规格参数
产品概述
| 来源 | 颅顶骨 |
|---|---|
| 形态 | 贴壁、成纤维样 |
| 培养 | a-MEM培养基+10%FBS 37℃ 5%CO2 |
| 传代 | 0.25%胰蛋白酶消化2-3min，比例1:2-1:4 |
| 产品简介 | MC3T3-E1细胞在含有抗坏血酸的培养基中生长后，选择亚克隆用于高或低成骨细胞分化和矿化，获得了MC3T3-E1 Subclone 4、MC3T3-E1 Subclone 14、MC3T3-E1 Subclone 24、MC3T3-E1 Subclone 30等多个亚系。MC3T3-E1 Subclone 4和MC3T3-E1 Subclone 14在抗坏血酸和3-4mM无机磷酸盐中生长表现出高水平的成骨细胞分化，10天后形成一个矿化良好的细胞外基质(ECM)。MC3T3-E1 Subclone 24和MC3T3-E1 Subclone 30在抗坏血酸中生长表现出很差的成骨细胞分化，不形成ECM，可以作为MC3T3-E1 Subclone 4和MC3T3-E1 Subclone 14的阴性对照。矿化的亚克隆选择的表达作为成骨细胞标记的mRNA及唾液酸糖蛋白(BSP)、骨钙素(OCN)和甲状旁腺激素/甲状旁腺激素相关蛋白受体的mRNA。高或者低的分化潜能的亚克隆在培养中生产出相似数量的胶原质，表达可比较的基本水平的mRNA编码Osf2/Cbfa1（成骨细胞相关转录因子）。植入免疫缺陷小鼠以后，高分化性的亚克隆形成与骨类似的形成小骨的编织骨，低分化细胞只是产生纤维组织。这些细胞系是研究体外成骨细胞分化的好模型，尤其是ECM信号，它们和原代培养颅顶成骨细胞的行为类似。 |
| 收货指南 | |
| 培养方法 | 对于悬浮细胞： 1. 若离心对细胞影响不大，可将细胞悬浮液收集在试管中； 2. 150x g离心5分钟，弃上清； 3. 加入新鲜培养液，按1∶2或1∶3的比例分装到2或3个培养瓶中（具体情况视细胞生长速度及密度决定）； 或： 1. 若离心对细胞影响大，培养瓶直立静置半小时左右，待大部分细胞都沉降到细胞瓶底，吸出1/2~2/3的旧培养基； 2. 加入新鲜培养液，按1∶2或1∶3的比例分装到2或3个培养瓶中（具体情况视细胞生长速度及密度决定），再逐瓶加入新鲜培养基。 对于贴壁细胞： 1. 尽量吸干净T25瓶原培养基； 2. 加3-4mL 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS； 3. T25瓶加1mL左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层； 4. 将培养瓶放入37度培养箱消化； 5. 消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3mL完全培养基终止胰酶消化； 6. 混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清； 7. 加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里； 8. 补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养。 |
| 生物安全等级 | 1请在无菌环境中操作，避免污染；为了保护细胞的稳定性，细胞传代次数不宜过多；为了结果的可靠性，实验前请确认细胞状态良好；严格遵守生物安全操作规程。 |
| 免责声明 | 本产品仅用于科研目的，不得用于临床诊断、治疗等用途。用户应遵循国家和地区的法律法规，自行承担使用本产品所产生的一切风险和责任。请在使用前仔细阅读本说明书，并按照指导操作。如有任何疑问或需要进一步信息，请与我们联系。 |
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