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通用反转录试剂盒(M-MLV,不含Taq酶)

品名: 通用反转录试剂盒(M-MLV,不含Taq酶)
型号: 暂无
  • 产品详情
  • 规格参数

产品简介

本试剂盒适用于各种 RNA制品的反转录反应。它采用M-MLV进行反转录反应,能够获得较长的反转录产物用于后续的PCR扩增和分子克隆实验。

本试剂盒中配置的酶为进口的酶。RT酶采用进口的M-MLV,所以cDNA更长,基因的信息保留得更完整!反转录过程中特异的RNase抑制剂可有效降低由于外源RNase污染而导致实验失败的风险。本试剂盒使用方便、快捷,可广泛用于cDNA克隆及目的基因检测等分子生物学实验。

注意事项:

1、 用于cDNA合成反应的相关试剂和耗材尽可能用DEPC进行处理,并在高压灭菌后使用。有些试剂不能高压灭菌时,首先用经过灭菌的器具、水等配制溶液后,再将溶液进行过滤除菌处理。

2、 试剂盒的各组分应在-20℃保存,避免反复冻融,有效期12个月。


3、 RNA样品要避免反复多次冻融,应使RNA在冰浴中处于融化状态。

操作步骤

一、反转录反应
1、在冰浴的无 RNase 的离心管中加入如下反应成分:
1-5μg 总 RNA 或 50-500ng mRNA
2μL Oligo(dT)16或 2 pmole 基因特异性引物
补 RNase-free ddH2O 至 14.5μL
2、70℃保温 5min 后迅速在冰上冷却 2min,简短离心收集反应液后加入以下各组分:
4μL 5×M-MLV Buffer
1μL dNTPs
0.5μL RNasin
1μL M-MLV
3、42℃温浴 60min,如果是用随机引物,请先将离心管置 25℃温浴 10min,再 42℃温浴 60min。
4、95℃加热 5min 终止反应,置冰上进行后续实验或-20℃保存。
5、若用于后续 PCR 扩增,用 RNase-free ddH2O 将反应体系稀释到 50μL,取 2-5μL 作为 PCR 反应模
板。
注意事项:
1、用于 cDNA 合成反应的相关试剂和耗材尽可能用 DEPC 进行处理,并在高压灭菌后使用。有些
试剂不能高压灭菌时,首先用经过灭菌的器具、水等配制溶液后,再将溶液进行过滤除菌处理。
2、试剂盒的各组分应在-20℃保存,避免反复冻融,有效期 12 个月。
3、RNA 样品要避免反复多次冻融,应使 RNA 在冰浴中处于融化状态。

产品参数

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储存条件:-20℃,有效期1年